Western萤光检测试剂ECL Plus是一种超敏ECL化学发光试剂盒,本产品与二抗上偶联的辣根过氧化物酶发生化学反应,发出萤光,从而可以通过用X光片压片或其它适当化学发光成像设备检测样品。
常规的Western检测,优先推荐使用ECL Star。对于丰度比较高的目的蛋白的检测,例如内参蛋白等的检测,推荐使用性价比更高的ECL Plus。对于低丰度较难检测的目的蛋白,优先推荐使用检测灵敏度最高的ECL Moon。但对于丰度适中的目的蛋白的检测,不太推荐使用ECL Moon,因为使用ECL Moon时由于检测灵敏度特别高,容易产生过曝的现象。
ECL Plus灵敏度高,比DAB显色的灵敏度至少高200倍,比Amersham公司的ECL或以前生产的ECL的灵敏度高20-50倍左右,比Pierce公司的SuperSignal West Pico Substrate的灵敏度高3-100倍。
ECL Plus的发光时间更长。在100微升1微克/毫升辣根过氧化物酶标记IgG中,加入100微升ECL Plus工作液或Pierce公司的SuperSignal West Pico Substrate工作液进行检测。在暗房中,两者均可发出肉眼可见的蓝色萤光,但加入ECL工作液的试管内的亮度明显高很多。最初数分钟内加入ECL Plus工作液的试管发光强度是加入SuperSignal West Pico Substrate工作液的试管的3倍。约30分钟后,加入ECL Plus工作液的试管仍然可以发出肉眼可见的较强的蓝色萤光,而加入Pierce公司的SuperSignal West Pico Substrate工作液的试管发出的萤光已经很难用肉眼进行分辨,定量结果显示此时加入ECL Plus工作液的试管发光强度是加入SuperSignal West Pico Substrate工作液的试管的100倍以上。
ECL Plus采用了全新配方,更加稳定。ECL Plus的两种试剂37℃水浴孵育30天,和4℃保存的试剂相比,对相同样品的检测效果无任何明显差异。
ECL Plus的背景很低,对PVDF膜和硝酸纤维素膜均适用。
保存条件:
4℃避光保存,一年有效。37℃避光保存,一个月有效。如果长期不用,可以-20℃避光保存。-20℃可以保存更长时间。
注意事项:
ECL Plus A液和B液在吸取过程中必须要更换枪头,A液和B液相互污染后会导致A液或B液逐渐失效,影响后续的使用效果。
各溶液使用后,请盖紧瓶盖,以防失效。特别是B液,含有氧化剂,比较容易被还原而失效。
ECL Plus的萤光持续时间很长,但开始反应后的30分钟内萤光更强一些,随后萤光会逐渐减弱,因此请注意充分利用这萤光较强的30分钟进行压片。
在ECL Plus的检测灵敏度仍不足以满足实验需要时,请选择检测灵敏度更高的ECL Star或ECL Moon
ECL Plus A液和B液均对人体有害,操作时请小心,并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。