NADP+/NADPH检测试剂盒(WST-8法) (NADP+/NADPH Assay Kit with WST-8)是一种基于WST-8的显色反应,通过比色法来检测细胞、组织或其它样品中NADP+ (氧化型辅酶II)和NADPH (还原型辅酶II)各自的量、比值和总量的检测试剂盒。
NADP+/NADPH以及NAD+/NADH的传统检测方法是检测NADPH或者NADH在340nm处吸收波长的变化,该方法灵敏度较低并易受样品中有类似紫外吸收物质的干扰,并且在紫外检测过程中通常需要加大检测样品量以弥补NADPH在340nm处吸光度过小的不足,因此该检测方法具有很大的局限性。
WST-8是MTT的一种升级替代产品,和MTT或其它MTT类似产品如XTT、MTS等相比有明显的优点。首先,MTT被一些脱氢酶还原生成的formazan不是水溶性的,需要有特定的溶液来溶解;而WST-8和XTT、MTS产生的formazan都是水溶性的,可以省去后续的溶解步骤。其次,WST-8产生的formazan比XTT和MTS产生的formazan更易溶解。再次,WST-8比XTT和MTS更加稳定,使实验结果更加稳定。另外,WST-8和MTT、XTT等相比,线性范围更宽,灵敏度更高。
WST-8和WST-1相比,检测灵敏度更高,更易溶解,并且更加稳定。
本试剂盒使用便捷,无需分离纯化细胞、组织或其它样品中的NADP+和NADPH,且特异性检测NADP+和NADPH,而不检测NAD+和NADH。本试剂盒可以检测含量低至0.05μM (2.5pmol)的NADP+或NADPH,在0.05μM (2.5pmol)至6μM (300pmol)之间呈现良好的线性关系。
本试剂盒适用于检测细胞、组织以及其它适当样品中的NADP+和NADPH各自的量、比值和总量。
保存条件:
-20℃保存,一年有效
注意事项:
本试剂盒中的所有试剂均需要冷冻保存,请严格按照保存条件进行保存。如果不是一次用完,为避免反复冻融导致产品失效,请适当分装后保存。
NADPH不太稳定,取出NADPH后请尽快使用。如果发现标准曲线不理想,很有可能是标准品发生了降解。
由于NADP+/NADPH提取液本身比较粘稠,以该提取液作为稀释液时,无论对标准品还是样品进行稀释,在稀释过程中务必保证稀释均匀,否则易造成实验数据产生较大波动。
在样品加样和混匀过程中,须尽量避免产生气泡,以免影响最终的吸光度测定。
如果不能非常严格地控制反应温度和反应时间,每次检测都需要设置标准曲线。
如果样品溶液中NADP+和NADPH浓度过高或过低,不在试剂盒的线性检测范围内时,可适当调整样品或者提取液的用量。
由于NADP+和NADPH很不稳定,在冻存过程中较易降解,所以宜尽量使用新鲜样品进行检测。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。